domingo, 24 de mayo de 2009

Practica No. 5 ELAVORACION DE UN FROTIS

ELAVORACION DE UN FROTIS




El alumno de laboratorio de análisis clínicos debe realizar un frotis con el producto obtenido en las cajas petri, el cual debe ser fino y delgado pára poder realizar el proceso de tincion.


MATERIALES:

1 Cajas petri con medio de cultivo y microorganismos en desarrollo
2 Asa bacteriológica de platino
3 Mecheros de bunsen
4 Vaso de precipitado de 50ml
5 vaso de precipitado 25ml de agua destilada
6 porta objetos


DESARROLLO

1 con el asa bacteriológica se va a realizar un frotis en un portaobjetos de cristal.

2 se toma el asa bacteriológica se pone en la flama del mechero dejándola al rojo vivo para que se esterilicé, se retira del fuego, se toma una pequeña gota de agua destilada, con ella misma se extrae una pequeña muestra del material bacteriológico crecido en las cajas petri.

Unas ves teniendo este material en el asa se acude a depositarlo en el portaobjetos en su parte central.

Desplazando de izquierda a derecha el material bacteriológico hasta que quede una película delgada, una ves teniéndola verificamos con el instructor si ya esta lista para poder fijarla al calor.

Ya realizado el frotis se fija de forma directa, se toma el portaobjetos en sus partes alo largo para su transporte.

Se toma el portaobjetos de forma lateral para poderlo pasar encima de la llama nunca dejar en forma directa en la flama.

Una vez fijado el frotis queda listo para el proceso de tinción.

Practica No. 4 OBSERVACION MACROSCOPICA

OBSERVACION MACROSCOPICA


El alumno realiza observacion macroscopica de las cajas petri anteriormente sembradas en las que se presenta desarrollo o crecimiento de colonias bacterianas.

MATERIALES

1 cajas petri ya con medio de cultivo elaborado
2 asa bacteriana
3 2 mecheros de bunsen
4 baso de presipitado con 25ml de agua deztilada
5 vernier o pie de rey
6 3 torundas de algodón seco
7 3torundas de algodón alcoholizadas

DESARROLLO


1 las cajas pitri ya sembradas se deposita las cajas petri en mesa de laboratorio para su observación, previamente la mesa vestida de papel blanco

2 observamos de forma microscópica los crecimientos de microorganismos en medio del cultivo anotando colores, olores, dimensión desde la mas pequeña hasta la mas grande, para ello necesitamos abrir la caja en nuestro campo de esterilización a base de los 2 mecheros

3para poder medir las colonias de microorganismos utilizaremos una herramienta de medición denominada vernier, medimos y anotamos con su prespectivo grafico

4 cada grafico debe llevar el pie de grafico o pie de foto donde nos indica la información de lo que estamos plasmando.

Practica No.3 SIEMBRA

SIEMBRA EN CAJAS PETRI EN FORMA DE ESTRIAS


Materiales

1 cajas petri con medio de cultivo elaborado
2 muestras de deshecho
3 asa bacteriologica

4 mecheros de bunsen
5 vasos de precipitado con agua destilada con 25ml
6 papel para cubrir mesa de laboratorio
7 papel secante
8 torundas de algodón
9 masquintape para etiquetar cajas petri alcoholizadas

Muestras de producto de desecho
1 toma de muestra (2.5ml de sangre) se deposita en el tubo de tapón rojo 2 orina (6 botes para orina)
1 portaobjeto

3 muestra de cavidad oral en espacios interdentales (hisopos)
4 agua preparada en la calle (aguas frescas)
5 raspado interdigital con portaobjetos.


Desarrollo:
Se realiza el proceso de siembra por estrías en medio de cultivo que contiene las cajas petri siendo este sólido. Se utiliza el asa bacteriológica, pasándola por el mechero y al ponerse al rojo vivo esta queda esterilizada.

Una ve esterilizada el asa se toma una pequeña gota de agua destilada y se pasa a tomar la muestra de desecho que se pretende observar esto es en 2 materiales de preferencia sólidos.


Para los materiales líquidos solo se esteriliza, se toma el producto y se aplica en la caja petri realizando una siembra en forma de estrías de los 7 tipos mostrados en el pizarrón.
Para poder sembrar una muestra de caveado de oral de espacio interdental se requiere un hisopo esterilizado, tomando la muestra del paciente en su cavidad oral y se aplica en caja petri en forma de estriado. Dentro de los 7 modelos de siembra, uno de ellos requiere varilla de cristal para poder sembrar el producto el cual séle da el nombre de siembra de dispersión.

Las cajas petri sembradas se deben depositar en la estufa de incubación a 37 grados centígrados. Durante el proceso practico debemos realizar nuestra bitácora de actividades, elaborando en 1 hoja cuadriculada para asignar cada una de la actividades enumeradas llevando secuencia en tiempos y en la cual debemos anotar fechas de trabajo realizado

Practica No.2 TECNICA DE ESTERILIZACION

TECNICA DE EZTERILIZACION

Se esteriliza el producto a 15 libras de presión y una temperatura de 120 grados centígrados durante 20 minutos.

Una vez terminada la esterilización se deja enfriar, el producto se libera de la autoclave, se entrega a las mesas y se hará el vaciado en cajas petri.

Para el vaciado en cajas petri se requiere un campo de esterilización en la mesa con 2 mecheros para que el producto este en el centro del campo de esterilización del mechero.

11 Se utiliza el vaso de precipitado de 250 ml el cual se pasara en forma breve por el fuego, para que este esterilizado (se pasara con la boquilla abierta) séle vierte el producto con la cantidad requerida y se vacía el producto con la cantidad requerida y se vacía ala caja petri, dejándola abierta con su tapa sobrepuesta asta que se enfríe, esto se hará las veces necesarias en nado de cajas.

Ya estando sólido el medio de cultivo se tapa, se etiqueta y se deposita en el enfriador, con el nombre de la mesa, grupo, datos del medio de cultivo.

practica No.1 MEDIO DE CULTIVO

Practica No. 1 Medio de Cultivo. (Reactivo)

1. objetivo realizado por el alumno
2. una introducción.
3. índice.
4. materiales.
5. instrucciones.

1) Llegar puntualmente al laboratorio.


2) Disponer de equipo de bioseguridad para realizar trabajo de laboratorio (5 min.)


3) Solicitar vale para materiales de laboratorio y vestir la mesa de laboratorio con papel color blanco para poder obtener un campo estéril un alumno de los que están dentro del laboratorio para realizar la practica, debe de anotar en el pizarrón los materiales que se utilizaran en la misma.


4) Materiales para medio de cultivo.

cristalería:
matraz erlenmeyer 250 ml.
vaso de precipitado 250 ml.
probeta graduada 100 ml.
vaso de precipitado 50 ml.
varilla de cristal o agitador.
vidrio de reloj.

pesos y medidas:
balanza granataría.

materiales de apoyo:
espátula.
utilización de técnica de esterilización autoclave
mechero de bunsen o káiser.
torundas de algodón.
papel secante color café.
cinta masquen tape café.
y en reactivos medio de cultivo.

5) Indicaciones para desarrollo del medio de cultivo.

pesar el polvo del medio de cultivo utilizado en el vidrio de reloj, realizando regla de tres. Solicitar agua destilada dependiendo la cantidad de producto que se valla a ocupar en cajas petri, siendo un total de 7 cajas petri por mesa; en el caso de nuestra mesa es necesario que sean 8 cajas petri.
una ves pesado el polvo del medio de cultivo se mezclaran el contenido de agua que se tiene en el vaso de precipitado.
para poder mezclar y que no queden grumos se utiliza la varilla de cristal para agitar conforme a las manecillas de reloj hasta que se disuelva el polvo en agua.
una vez que ya tenemos la mezcla hecha dejamos reposar el producto de acuerdo a las indicaciones que contiene el deposito de medio de cultivo.
NOTA: las indicaciones del medio de cultivo que contiene en la etiqueta. Del deposito se deben de transcribir para conocer bien los datos.

6) Se le da el nombre de rehidratación al polvo con agua y observando las indicaciones dadas se tomara el porcentaje requerido de polvo para la mezcla con el agua que soliciten de acuerdo a las cajas petri que se llevan a preparar.

después de que reposo del producto se le da movimientos en rotación, juego de muñeca exponiéndolo al fuego del mechero, estos movimientos darán como resultado una ebullición (hervor). Y se le dará desde el momento que inicia la ebullición un minuto de tiempo para que quede listo nuestro medio de cultivo en forma liquida.
se debe tener cuidado con la ebullición del producto en el matraz erlenmeyer ya que este puede rebasar sus limites y ocasionar un accidente por quemaduras.
una ves terminado el proceso de ebullición del medio de cultivo se deja enfriar, se tamponea con torundas de algodón, se cubre con cinta masquen tape y se etiqueta con registro del medio de cultivo, núm. mesa y fecha de elaboración así como la hora en que se realizo.

7) Todos los integrantes se ponen de acuerdo para el proceso de esterilización y se depositaran en la autoclave. Que ya previamente se ha preparado al principio de la práctica.


Técnica de esterilización Autoclave (calor húmedo).
se esterilizara el producto a 15 libras de presión y una temperatura de 120 °C durante 20 min.
Una ves terminada la esterilización se deja enfriar, se libera del autoclave, se entrega a las mesas y se lleva a cabo el vaciado en las cajas petri.
Para el baseado en cajas petri se requiere de un campo de esterilización en la mesa con 2 mecheros para que el producto, se libere del autoclave se entrega en las mesas y se llevara acabo el baseado en las cajas petri.
5 Se utiliza baso de precipitado de 50 ml, el cual se pasara en forma breve por el fuego en la boquilla del baso para que este, este esterilizado, se le vierte el producto en la cantidad requerida y se bacía en la caja petri, dejándola abierta con su tapa, sobre encimada, asta que enfrié. Estos se hará todas las veces necesarias del llenado de cajas.
Ya estando solido el medio de cultivo se tapa, se etiqueta y se deposita en el enfriador

ENLISTADO DE PRACTICAS

Practica-1 Operar equipo y material de laboratorio así como elaborar medios de cultivo.

Practica-2 Elaborar medio de cultivo.

Practica-3 Esterilización d medio de cultivo.

Práctica-4 Siembras en estría de medio de cultivo.

Practica-5 Observación de desarrollo de microorganismos en medio de cultivo, lectura de colonias.

Practica-6 Protis para tinción.

Practica-7 Tinción de Gram

Practica-8 Observación microscópica en objetivos 100X con aceite de inmersión

Practica-9 Prueba de reacciones febriles para prueba de aglutinación en serología tubo son anti coagulo (rojo)

Practica-10 Prueba de aglutinación en sangre fresca utilizando tuvo coagulante (morado)

viernes, 22 de mayo de 2009

TAREA #7 COCOS Y BACILLUS

COCOS

Los cocos piógenos (productoras de pus) son bacterias esféricas que causan diferentes infecciones supurativas Incluye a cocos Gram-positivos: Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes y Streptococcus pneumoniae, y a los cocos Gram-negativas Neisseria gonorrhoeae y N. meningitidis. Estas bacterias son patogenas y se estima que producen un tercio de las infecciones humanas, entre ellas infecciones en la garganta, neumonía, enfermedades de la piel, shock septicémicos, meningitis, gonorrea, envenenamiento de alimentos.

Staphylococcus aureus es una de las bacterias mas exitosas con un amplio rango de virulencia lo que le permite ser el agente de un amplio número de infecciones y a menudo esta presente en la flora normal humana (piel, mucosa nasal y tracto genital ), esto asegura su transmisibilidad de un individuo a otro. En términos de filogenia fisiología y genética, estos géneros de bacterias están poco relacionados entre ellos. Sin embargo comparten una ecología común, como patógenos humanos. El pus es el resultante de la batalla entre los fagocitos (neutrófilos) y las bacterias invasoras. A medida que las bacterias son ingeridas y muertas por los fagocitos los mismos eventualmente se lisan y liberan su contenido que, junto a los productos de digestión de las bacterias, constituyen el principal material del pus. Por otra parte como una defensa contra los fagocitos los estrepto y estafilococos producen toxinas que matan los neutrófilos antes de que ingieran las bacterias contribuyendo al aumento del pus.

Dos especies de Staphylococcus viven asociadas a los humanos: Staphylococcus epidermidis habitante normal de la piel y membranas mucosas y Staphylococcus aureus con una localización variada, aunque generalmente se lo encuentra en mucosa nasal. S. epidermidis raramente es patógeno y probablemente beneficia a su huésped produciendo ácidos y retardando de este modo el crecimiento de hongos dermatofitos. S. aureus siempre posee el potencial de causar enfermedades y por lo tanto se lo considera patógeno. Diferentes cepas de S. aureus difieren en el rango de enfermedades que causan incluyéndose entre ellas forúnculos y granos, infecciones de heridas, neumonía, osteomielitis, septicemia, intoxicación alimentaria, y shock tóxico. S. aureus encabeza el ranking de productores de infecciones intrahospitalarias entre las bacterias Gram-positivas.

También es notoria su resistencia a la penicilina y otros antibióticos.
Streptococcus pyogenes, más especificamente Streptococos del grupo A beta hemolíticos, al igual que S. aureus, son la causa de un conjunto de enfermedades supurativas y toxigénicas y para completar algunas enfermedades autoinmunes y alérgicas.

S. pyogenes raramente se encuentra como flora normal (<1%),>fiebre reumática y la glomérulo nefritis (las así llamadas secuelas post-estreptococcicas). A diferencia de los estafilococos no han desarrollado una resistencia generalizada a la penicilina y a los antibióticos beta lactámicos, por lo tanto los beta lactámicos SON LA DROGA DE ELECCIÓN para el tratamiento de las enfermedades estreptocócicas agudas.

Streptococcus pneumoniae es la causa mas frecuente de neumonía en humanos. También es causa frecuente de otitis media y meningitis. Las bacterias colonizan la nasofaringe y desde allí acceden a pulmones o trompa de Eustaquio. Aquellas que poseen cápsulas pueden impedir la fagocitosis por los macrófagos alveolares por lo tanto las cepas capsuladas pueden invadir los pulmones y son VIRULENTAS mientras que las no capsuladas que son rápidamente fagocitadas son no virulentas.

Bacillus.

El género Bacillus está compuesto por bacilos grampositivos grandes caracterizados por su capacidad para producir endosporas. El género incluye microorganismos aerobios estrictos y anaerobios facultativos. Bacillus anthracis es causante de enfermedad en el ser humano. Muchas otras especies están distribuidas en la naturaleza y se hallan en la mayor parte de las muestras de suelos, agua y polvo. Ciertos miembros de dicho género han adquirido importancia como productores de antibióticos. (1)
Bacillus anthracis.

El carbunco (enfermedad de los animales herbívoros, ovinos y bovinos, equinos, porcinos y caprinos) es causado por el B. anthacis, un bacilo grampositivo aerobio y formador de esporas. Es un bacilo recto que mide de 3 a 5 micras de largo y de 1 a 1.2 micras de ancho, es inmóvil. Están encapsulados durante la proliferación en el animal infectado.
Características de su cultivo. Proliferan bien en placas con agar sangre. La proliferación máxima se obtiene con un pH de 7-7.4 en condiciones aerobias, pero se produce desarrollo en ausencia de oxígeno. Identificación de laboratorio. Ni los aspectos morfológicos ni las características de cultivo habituales permiten diferenciar al B. anthracis de las cepas inmóviles de B. cereus, el microorganismo con el que más fácilmente se confunde.

Sin embargo, las cepas virulentas de B. anthracis son los únicos microorganismos que producen colonias rugosas cuando proliferan en ausencia de un mayor nivel de CO2 y colonias mucoides cuando proliferan en un medio con bicarbonato de sodio en una atmósfera con un 5% de CO2. Los
seres humanos se infectan de una de tres formas:
1. La vía cutánea. Los microorganismos acceden a través de pequeñas abrasiones o cortes y se multiplican.
2. Inhalación. Los microorganismos son inhalados, se multiplican en los pulmones y son barridos hacia los ganglios linfáticos hiliares de drenaje, donde se rpoduce una necrosis hemorrágica.
3. Ingestión. Rara vez los microorganismos son ingeridos en carne infectada, con ella resultante invasión y ulceración de la mucosa gastrointestinal.

FICHA BIBLIOGRAFICA

http://fai.unne.edu.ar/biologia/bacterias/Bacteriasrelavantes.htm